Σετ καθαρού κυττάρου/βακτηρίων RNAprep

Για καθαρισμό ολικού RNA υψηλής ποιότητας από κύτταρα και βακτήρια.

Το κιτ καθαρού κυττάρου/βακτηρίων RNAprep παρέχει μια γρήγορη, απλή και οικονομικά αποδοτική μέθοδο για τον καθαρισμό του συνολικού RNA από καλλιεργημένα κύτταρα και δείγματα βακτηρίων χρησιμοποιώντας αποτελεσματική στήλη περιστροφής και μοναδικό ρυθμιστικό σύστημα. Το κιτ περιλαμβάνει RNase-Free Spin Column CR3 για καθαρισμό υψηλής ποιότητας RNA χρησιμοποιώντας τεχνολογία μεμβράνης πυριτίας. Ολικό RNA υψηλής ποιότητας θα μπορούσε να ληφθεί σε 30-40 λεπτά με υψηλή καθαρότητα και είναι απαλλαγμένο από πρωτεΐνη και γονιδιωματική μόλυνση DNA.

Γάτα. Οχι Μέγεθος συσκευασίας
4992235 50 προετοιμασίες

Λεπτομέρεια προϊόντος

Πειραματικό Παράδειγμα

Συχνές ερωτήσεις

Ετικέτες προϊόντων

Χαρακτηριστικά

■ Βελτιστοποιημένα ρυθμιστικά και πρωτόκολλα για καλλιεργημένα κύτταρα και δείγματα βακτηρίων καθιστούν τη διαδικασία απλή και βολική.
Η μοναδική DNase I ελαχιστοποιεί τη μόλυνση του γονιδιωματικού DNA.
■ Οι μοναδικές στήλες φιλτραρίσματος χωρίς RNase CS εξαλείφουν άλλες μολύνσεις.
■ Το υψηλής καθαρότητας και έτοιμο προς χρήση RNA είναι κατάλληλο για ευαίσθητες μεταγενέστερες εφαρμογές.
■ Δεν απαιτείται εκχύλιση φαινόλης/χλωροφορμίου, καθίζηση LiCl και αιθανόλης, δεν απαιτείται φυγοκέντρηση κλίσης CsCl, γεγονός που καθιστά τη διαδικασία ασφαλή και αξιόπιστη.

Εφαρμογές

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR σε πραγματικό χρόνο.
Ανάλυση τσιπ.
■ Screening PolyA, in vitro μετάφραση, ανάλυση προστασίας RNase και μοριακή κλωνοποίηση.

Όλα τα προϊόντα μπορούν να προσαρμοστούν για ODM/OEM. Για λεπτομέρειες,κάντε κλικ στην επιλογή Προσαρμοσμένη υπηρεσία (ODM/OEM)


  • Προηγούμενος:
  • Επόμενο:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example Υλικό: Ανθρώπινα κύτταρα Jurkat (1 × 106 )
    Μέθοδος: Το συνολικό RNA των ανθρώπινων κυττάρων Jukat απομονώθηκε χρησιμοποιώντας το κιτ καθαρού κυττάρου/βακτηρίων RNAprep.
    Αποτελέσματα: Παρακαλούμε δείτε την παραπάνω εικόνα ηλεκτροφόρησης σε πήκτωμα αγαρόζης. Φορτώθηκαν 2-4 μl 50 μl εκλούσματος ανά λωρίδα. Η ηλεκτροφόρηση πραγματοποιήθηκε στα 6 V/cm για 30 λεπτά σε γέλη αγαρόζης 1%.
    Experimental Example Υλικό: TOP10 E.coli (1 × 108)
    Μέθοδος: Το συνολικό RNA του TOP10 E.coli απομονώθηκε χρησιμοποιώντας το RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit.
    Αποτελέσματα: Παρακαλούμε δείτε την παραπάνω εικόνα ηλεκτροφόρησης σε πήκτωμα αγαρόζης. Φορτώθηκαν 2-4 μl 50 μl εκλούσματος ανά λωρίδα. Η ηλεκτροφόρηση πραγματοποιήθηκε στα 6 V/cm για 30 λεπτά σε γέλη αγαρόζης 1%.
    Ε: Απόφραξη στήλης

    Α-1 Κυτταρική λύση ή ομογενοποίηση δεν επαρκεί

    ---- Μειώστε τη χρήση δείγματος, αυξήστε την ποσότητα του ρυθμιστικού λύσης, αυξήστε την ομογενοποίηση και το χρόνο λύσης.

    A-2 Το ποσό του δείγματος είναι πολύ μεγάλο

    ---- Μειώστε την ποσότητα του δείγματος που χρησιμοποιήθηκε ή αυξήστε την ποσότητα του ρυθμιστικού λύσης.

    Ε: Χαμηλή απόδοση RNA

    Α-1 Ανεπαρκής κυτταρική λύση ή ομογενοποίηση

    ---- Μειώστε τη χρήση δείγματος, αυξήστε την ποσότητα του ρυθμιστικού λύσης, αυξήστε την ομογενοποίηση και το χρόνο λύσης.

    A-2 Το ποσό του δείγματος είναι πολύ μεγάλο

    ---- Ανατρέξτε στη μέγιστη ικανότητα επεξεργασίας.

    Το R-A-3 δεν εκλούεται πλήρως από τη στήλη

    ---- Αφού προσθέσετε νερό χωρίς RNase, αφήστε το για λίγα λεπτά πριν από τη φυγοκέντρηση.

    Α-4 Αιθανόλη στο υγρό έκλουσης

    ---- Μετά το ξέπλυμα, φυγοκεντρήστε ξανά και αφαιρέστε το ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης όσο το δυνατόν περισσότερο.

    Το μέσο καλλιέργειας κυττάρων A-5 δεν αφαιρείται εντελώς

    ---- Κατά τη συλλογή κυττάρων, βεβαιωθείτε ότι έχετε αφαιρέσει το μέσο καλλιέργειας όσο το δυνατόν περισσότερο.

    A-6 Τα κύτταρα που αποθηκεύονται στο RNAstore δεν φυγοκεντρούν αποτελεσματικά

    ---- Η πυκνότητα του RNAstore είναι μεγαλύτερη από το μέσο μέσο κυτταρικής καλλιέργειας. άρα η φυγόκεντρη δύναμη πρέπει να αυξηθεί. Προτείνεται η φυγοκέντρηση στα 3000x g.

    A-7 Χαμηλή περιεκτικότητα σε RNA και αφθονία στο δείγμα

    ---- Χρησιμοποιήστε ένα θετικό δείγμα για να προσδιορίσετε εάν η χαμηλή απόδοση προκαλείται από το δείγμα.

    Ε: Αποικοδόμηση RNA

    A-1 Το υλικό δεν είναι φρέσκο

    ---- Οι νωποί ιστοί πρέπει να αποθηκεύονται σε υγρό άζωτο αμέσως ή να τοποθετούνται αμέσως στο αντιδραστήριο RNAstore για να διασφαλιστεί το αποτέλεσμα της εξαγωγής.

    A-2 Το ποσό του δείγματος είναι πολύ μεγάλο

    ---- Μειώστε το ποσό δείγματος.

    A-3 RNase contamination

    ---- Παρόλο που το ρυθμιστικό διάλυμα που παρέχεται στο κιτ δεν περιέχει RNase, είναι εύκολο να μολυνθεί η RNase κατά τη διαδικασία εξαγωγής και θα πρέπει να χειρίζεται με προσοχή.

    Α-4 Ρύπανση ηλεκτροφόρησης

    ---- Αντικαταστήστε το ρυθμιστικό ηλεκτροφόρησης και βεβαιωθείτε ότι τα αναλώσιμα και το ρυθμιστικό φόρτωσης είναι απαλλαγμένα από μόλυνση RNase.

    A-5 Υπερβολική φόρτωση για ηλεκτροφόρηση

    ---- Μειώστε την ποσότητα φόρτωσης δείγματος, η φόρτωση κάθε φρεατίου δεν πρέπει να υπερβαίνει τα 2 μg.

    ΕΡ .: Μόλυνση DNA

    Το ποσό δείγματος A-1 είναι πολύ μεγάλο

    ---- Μειώστε το ποσό δείγματος.

    A-2 Ορισμένα δείγματα έχουν υψηλή περιεκτικότητα σε DNA και μπορούν να υποβληθούν σε επεξεργασία με DNase.

    ---- Πραγματοποιήστε επεξεργασία DNase χωρίς RNase στο ληφθέν διάλυμα RNA και το RNA μπορεί να χρησιμοποιηθεί απευθείας για επακόλουθα πειράματα μετά τη θεραπεία ή μπορεί να καθαριστεί περαιτέρω με κιτ καθαρισμού RNA.

    Ε: Πώς να αφαιρέσετε το RNase από πειραματικά αναλώσιμα και γυαλικά;

    Για γυαλικά, ψημένα στους 150 ° C για 4 ώρες. Για πλαστικά δοχεία, βυθισμένα σε NaOH 0,5 Μ για 10 λεπτά, στη συνέχεια ξεπλένονται καλά με νερό χωρίς RNase και στη συνέχεια αποστειρώνονται για να απομακρυνθεί εντελώς η RNase. Τα αντιδραστήρια ή τα διαλύματα που χρησιμοποιούνται στο πείραμα, ειδικά το νερό, πρέπει να είναι απαλλαγμένα από RNase. Χρησιμοποιήστε νερό χωρίς RNase για όλα τα παρασκευάσματα αντιδραστηρίου (προσθέστε νερό σε καθαρή γυάλινη φιάλη, προσθέστε DEPC σε τελική συγκέντρωση 0,1% (V/V), ανακινήστε όλη τη νύχτα και αφήστε αυτόκλειστο).

    Γράψτε το μήνυμά σας εδώ και στείλτε το σε εμάς