Κιτ γονιδιωματικού DNA TGuide Plant

A-1 Χαμηλή συγκέντρωση κυττάρων ή ιού στο αρχικό δείγμα-Εμπλουτίστε τη συγκέντρωση κυττάρων ή ιών.

A-2 Ανεπαρκής λύση των δειγμάτων-Τα δείγματα δεν έχουν αναμειχθεί καλά με το ρυθμιστικό λύσης. Προτείνεται να αναμιχθεί καλά με σφυγμο-στροβιλισμό για 1-2 φορές. —Ανεπαρκής κυτταρική λύση που προκαλείται από τη μείωση της δραστηριότητας της πρωτεϊνάσης Κ. —Ανεπαρκή κυτταρική λύση ή αποικοδόμηση πρωτεΐνης λόγω ανεπαρκούς ζεστού χρόνου μπάνιου. Προτείνεται να κοπεί ο ιστός σε μικρά κομμάτια και να παραταθεί ο χρόνος του μπάνιου για να απομακρυνθεί όλο το υπόλειμμα στο προϊόν λύσης.

A-3 Ανεπαρκής προσρόφηση DNA. -Καμία αιθανόλη ή χαμηλό ποσοστό αντί 100% αιθανόλης δεν προστέθηκε πριν το προϊόν λύσης μεταφερθεί στη στήλη περιστροφής.

A-4 Η τιμή pH του ρυθμιστικού διαλύματος έκλουσης είναι πολύ χαμηλή. —Ρυθμίστε το pH μεταξύ 8,0-8,3.

Υπολειμματική αιθανόλη στο υγρό έκλουσης.

—Υπάρχει υπολειπόμενο ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης PW στο υγρό έκλουσης. Η αιθανόλη μπορεί να απομακρυνθεί με φυγοκέντρηση της στήλης περιστροφής για 3-5 λεπτά και στη συνέχεια τοποθέτηση σε θερμοκρασία δωματίου ή επωαστήρα 50 ℃ για 1-2 λεπτά.

A-1 Το δείγμα δεν είναι φρέσκο. - Εξαγάγετε ένα θετικό δείγμα DNA ως μάρτυρα για να προσδιορίσετε εάν το DNA στο δείγμα έχει υποβαθμιστεί.

A-2 Ακατάλληλη προεπεξεργασία. - Προκαλείται από υπερβολική λείανση υγρού αζώτου, ανάκτηση υγρασίας ή πολύ μεγάλη ποσότητα του δείγματος.

Οι προεπεξεργασίες πρέπει να διαφέρουν για διαφορετικά δείγματα. Για φυτικά δείγματα, φροντίστε να αλέσετε καλά σε υγρό άζωτο. Για ζωικά δείγματα, ομογενοποιήστε ή αλέστε καλά σε υγρό άζωτο. Για δείγματα με κυτταρικά τοιχώματα που είναι δύσκολο να σπάσουν, όπως βακτήρια G+ και ζύμη, προτείνεται η χρήση λυσοζύμης, λυτικάσης ή μηχανικών μεθόδων για τη θραύση των κυτταρικών τοιχωμάτων.

4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit υιοθετεί μια μέθοδο με βάση τη στήλη που απαιτεί χλωροφόρμιο για την εξαγωγή. Είναι ιδιαίτερα κατάλληλο για διάφορα δείγματα φυτών, καθώς και για ξηρά σκόνη φυτών. Το Hi-DNAsecure Plant Kit βασίζεται επίσης στη στήλη, αλλά δεν χρειάζεται εξαγωγή φαινόλης/χλωροφορμίου, καθιστώντας το ασφαλές και μη τοξικό. Είναι κατάλληλο για φυτά με υψηλή περιεκτικότητα σε πολυσακχαρίτες και πολυφαινόλες. 4992709/4992710 Το DNAquick Plant System υιοθετεί μια μέθοδο με βάση το υγρό. Δεν απαιτείται επίσης εξαγωγή φαινόλης/χλωροφορμίου. Η διαδικασία καθαρισμού είναι απλή και γρήγορη χωρίς όριο για τις ποσότητες έναρξης του δείγματος, έτσι ώστε οι χρήστες να μπορούν να προσαρμόσουν την ποσότητα με ευελιξία σύμφωνα με τις πειραματικές απαιτήσεις. Μεγάλο μέγεθος θραυσμάτων gDNA μπορεί να ληφθεί με υψηλή απόδοση.

Το γονιδιωματικό DNA εξήχθη από διαφορετικούς όγκους δειγμάτων ανθρώπινου ολικού αίματος με το κιτ TIANamp Blood DNA. Τα αποτελέσματα έχουν ως εξής. Τα αποτελέσματα παρατίθενται μόνο ως αναφορά, τα πραγματικά αποτελέσματα εξαγωγής εξαρτώνται από τις συνθήκες των δειγμάτων.

Η εξαγωγή DNA θρόμβου αίματος μπορεί να πραγματοποιηθεί χρησιμοποιώντας τα αντιδραστήρια που παρέχονται σε αυτά τα δύο κιτ απλώς αλλάζοντας το πρωτόκολλο στη συγκεκριμένη οδηγία για την εξαγωγή DNA θρόμβου αίματος. Το μαλακό αντίγραφο του πρωτοκόλλου εξαγωγής DNA θρόμβου αίματος μπορεί να εκδοθεί κατόπιν αιτήματος.

Εναιωρήστε το φρέσκο ​​δείγμα με 1 ml PBS, φυσιολογικό ορό ή ρυθμιστικό ΤΕ. Ομογενοποιήστε πλήρως το δείγμα με έναν ομογενοποιητή και συλλέξτε το ίζημα στον πυθμένα ενός σωλήνα με φυγοκέντρηση. Απορρίψτε το υπερκείμενο και επαναιωρήστε το ίζημα με 200 μl ρυθμιστικού GA. Ο ακόλουθος καθαρισμός DNA μπορεί να πραγματοποιηθεί σύμφωνα με τις οδηγίες.

Για τον καθαρισμό του gDNA σε δείγματα πλάσματος, ορού και υγρού σώματος, συνιστάται το κιτ TIANamp Micro DNA. Για τον καθαρισμό του gDNA του ιού από δείγματα ορού/πλάσματος, συνιστάται το κιτ DNA/RNA ιού TIANamp. Για τον καθαρισμό του βακτηριακού gDNA από δείγματα ορού και πλάσματος, συνιστάται το TIANamp Bacteria DNA Kit (η λυσοζύμη πρέπει να περιλαμβάνεται για θετικά βακτήρια). Για δείγματα σάλιου, συνιστάται το κιτ DNA Hi-Swab και το κιτ DNA TIANamp Bacteria.

Το DNAsecure Plant Kit ή το DNAquick Plant System συνιστώνται για εξαγωγή γονιδιώματος μυκήτων. Για την εξαγωγή γονιδιώματος ζύμης, συνιστάται το κιτ DNA TIANamp Yeast (η λυτικάση πρέπει να παρασκευάζεται μόνος του).